【科研問答】ELISA實(shí)驗(yàn)中,“花板”是什么意思?
上海軒澤康生物有限公司 / 2025-04-02 瀏覽量:
在ELISA實(shí)驗(yàn)中,“花板”通常是指酶標(biāo)板孔內(nèi)出現(xiàn)的顏色不均勻、邊緣與中心顏色差異大、斑駁或斑點(diǎn)狀顯色的現(xiàn)象,從而干擾吸光度(OD值)的測定,導(dǎo)致數(shù)據(jù)重復(fù)性差,影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。一旦出現(xiàn)“花板”,實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須放棄,不僅浪費(fèi)物料和時(shí)間,而且還會出現(xiàn)樣本量缺少、交叉污染、報(bào)告延遲等一系列問題。
上海軒澤康生物技術(shù)解析:通過系統(tǒng)排查原因并優(yōu)化步驟,“花板”的主要原因有:1)包被或封閉不充分。2)洗滌不徹底。3)酶標(biāo)二抗或底物問題。4)操作不當(dāng)。5)樣本或試劑污染。嚴(yán)格控制洗滌流程、控制環(huán)境因素(避免高溫、強(qiáng)光,顯色階段避光)、加樣時(shí)槍頭避免觸碰孔壁;孵育時(shí)覆蓋封板膜等均可有效減少花板現(xiàn)象,提高ELISA結(jié)果的可靠性。