ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)）加樣是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵步驟之一，它包含了加樣本、加檢測(cè)抗體、加底物、加終止液等步驟。操作不當(dāng)可能導(dǎo)致結(jié)果偏差，因此要注意以下事項(xiàng)：

1）實(shí)驗(yàn)室使用的微量加樣器應(yīng)注意保養(yǎng)并定期校正。ELISA較為敏感，每孔加入液體量誤差會(huì)導(dǎo)致最后讀數(shù)差別，因此避免儀器帶來(lái)誤差。

2）加樣前，溶液充分混勻，加樣時(shí)不可90°向孔中滴加液體，否則會(huì)導(dǎo)致液體殘留在吸頭上，加樣不準(zhǔn)確。正確加樣方法：45°吸頭貼著孔壁和液面的交界處加入。

3）加樣時(shí)速度不可過(guò)快，否則無(wú)法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。

4）加樣時(shí)避免液體濺出，如有樣本濺出應(yīng)用吸水紙輕輕拭干并作相應(yīng)記錄。

5）每次加樣順序一致，尤其底物、終止液順序一致，保證每個(gè)孔顯色時(shí)間相同。

通過(guò)規(guī)范操作和細(xì)節(jié)控制，可顯著提高ELISA結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。若發(fā)生邊緣效應(yīng)（周邊孔顯色異常），建議使用封板膜密封，避免蒸發(fā)不均。