答應(yīng)我! | 看完再處理血液樣本好嗎...
上海軒澤康生物有限公司 / 2024-11-12 瀏覽量:
一般來(lái)說(shuō),由于ELISA實(shí)驗(yàn)只能檢測(cè)可溶性蛋白質(zhì)的含量,因此要求樣本應(yīng)清晰透明并離心除去沉淀物或懸浮物質(zhì)。為確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性,-20℃或-80℃保存的樣本應(yīng)在1-6個(gè)月內(nèi)完成檢測(cè),4℃保存的樣本在一周內(nèi)完成檢測(cè)。
大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異顯色。此外還應(yīng)避免細(xì)菌污染,因?yàn)榫w中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。
血清如何分離:
① 取全血于醫(yī)用血清管中,輕輕顛倒5~8次;
② 室溫血液自然凝固10~20分鐘,目的是讓全血充分發(fā)生凝血反應(yīng);
③ 離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)
④ 取上清,分裝凍存?zhèn)溆茫?4小時(shí)內(nèi)檢測(cè)存于2-8℃;1個(gè)月內(nèi)檢測(cè)存于-20℃;長(zhǎng)期檢測(cè)可存于-80℃,可放置保存6個(gè)月)
注意:樣本應(yīng)避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。