樣本是菌株 | 檢測(cè)之前該如何操作呢?
上海軒澤康生物有限公司 / 2024-11-19 瀏覽量:
一. ELISA實(shí)驗(yàn)(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)中,樣本是菌株,檢測(cè)之前該怎么處理呢?別急,處理方案如下:
1、 收集細(xì)菌懸液,1000×g離心10min,棄去培養(yǎng)基,用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。(第一步的潤(rùn)洗不需要重懸)
2、加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液(臨用前加入蛋白酶抑制劑)重懸細(xì)菌。通常6孔板一個(gè)孔的細(xì)菌量需要150~250μL PBS重懸。(PBS的ph為中性;菌一個(gè)6孔板,沒(méi)有具體的量)
3、 將樣品放入-20℃或-80℃,用高壓細(xì)菌破碎機(jī)或者使樣品冷凍,再放室溫解凍樣品,反復(fù)凍融幾次,使細(xì)菌充分裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎,以達(dá)到裂解的目的。(反復(fù)凍融處理,低溫部分可以用液氮)
4、 4℃ 10000×g 離心10min,除去細(xì)菌碎片,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。
二. 打算把樣本寄樣送檢測(cè),需要怎么做?
我司訂購(gòu)任意一款ELISA試劑盒均提供免費(fèi)來(lái)樣檢測(cè)服務(wù),直接用離心管收集菌液+干冰+泡沫箱運(yùn)輸。送檢前需活化,用液體培養(yǎng)基振蕩15-30分鐘,制成菌懸液(4℃冰箱保存建議在一天左右),樣本收到后由實(shí)驗(yàn)專員進(jìn)行處理。
菌液長(zhǎng)期保存:可采用甘油管保存法。在菌液中加入一定比例,充分混勻后,放在-80℃冰箱里,不會(huì)影響活性。
舉例: