植物乳酸脫氫酶（LDH）ELISA檢測(cè)試劑盒使用手冊(cè) 

                                                                       產(chǎn)品貨號(hào)：XZK-15993

【摘要】：乳酸脫氫酶（LDH）是一類NAD依賴性激酶，有LDHA、LDHB、LDHC三種亞基，可構(gòu)成6種四聚體同工酶。動(dòng)物乳酸脫氫酶是由4個(gè)亞單位組成的四聚體，常見(jiàn)的A、B兩種亞基構(gòu)成的5種LDH同工酶（LDH1-5），C亞基則僅組成一種LDH同工酶即LDH-C4。 乳酸脫氫酶為含鋅離子的金屬蛋白，分子量為135-140kD，是糖無(wú)氧酵解及糖異生的重要酶系之一，可催化丙酸與L-乳酸之間的還原與氧化反應(yīng)，也可催化相關(guān)的α-酮酸。LDH廣泛存在于人體組織中，以腎臟含量最高，其次是心肌和骨肌。紅細(xì)胞內(nèi)LDH約為正常血清的100倍。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測(cè)植物等標(biāo)本中LDH活性。凡訂購(gòu)我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，歡迎咨詢、訂購(gòu)！

樣品收集、處理及保存方法：

1.  樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)榀B氮鈉（NaN3）是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的抑制劑。

2.  標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行。

3.  植物萃取液或其它相關(guān)樣本：請(qǐng)1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)。

4.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

植物處理方案：

1、 新鮮植物組織請(qǐng)?jiān)谝旱谐浞盅心ィ鐭o(wú)液氮，剪碎，玻璃勻漿器研磨也可；

2、 加入樣品體積9倍（鮮重：勻漿液體積）的提取液（0.1mmol PH7.4 PBS ）, 4℃浸提2h；

3、 請(qǐng)于4℃ ，3000rpm，離心10min，收集上清；

4、 取上清檢測(cè)。 

注：標(biāo)本均應(yīng)密封保存，短期內(nèi)使用（1周左右），可4度保存；若樣本收集與實(shí)驗(yàn)時(shí)間相隔較長(zhǎng)，務(wù)必保存在-20或-80度，盡量不要超過(guò)半年，同時(shí)避免反復(fù)凍融。

植物乳酸脫氫酶（LDH）ELISA檢測(cè)試劑盒組成：（檢測(cè)范圍請(qǐng)以新版說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)）

注意：使用前請(qǐng)檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致。

技術(shù)小提示：

1.      當(dāng)混合或重溶蛋白溶液時(shí)，盡量避免起沫。

2.      為了避免交叉感染，配置不同濃度標(biāo)準(zhǔn)品、上樣、加不同試劑都需要更換槍頭。另外不同試劑請(qǐng)分別使用不同的移液槽。

3.      每次孵育時(shí)，請(qǐng)正確使用封板膠可保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

4.      混合后的顯色底物在上板前應(yīng)為無(wú)色，請(qǐng)避光保存；假如微孔板后，將由物色變成不同深度的藍(lán)色。

5.      終止液上板順序應(yīng)同顯色底物上板順序一致；加入終止液后，孔內(nèi)顏色由藍(lán)變黃；若孔內(nèi)有綠色，則表明孔內(nèi)液體未混勻；請(qǐng)充分混合。