犬抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）ELISA檢測(cè)試劑盒使用手冊(cè) 

                                                                       產(chǎn)品貨號(hào)：XZK-16149

【摘要】：抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)也被稱為抗凝血酶。從抗凝血酶I到抗凝血酶IV的名稱源于Seegers、Johnson和Fell在20世紀(jì)50年代進(jìn)行的早期研究?？鼓窱II（AT III）是指血漿中一種能使凝血酶失活的物質(zhì)。它是使凝血系統(tǒng)的幾種酶失活的小蛋白質(zhì)分子。它是一種由肝臟產(chǎn)生的糖蛋白，由432個(gè)氨基酸組成。它包含三個(gè)二硫鍵和總共四個(gè)可能的糖基化位點(diǎn)。α-抗凝血酶是在血漿中發(fā)現(xiàn)的抗凝血酶的主要形式，并且在其四個(gè)糖基化位點(diǎn)的每一個(gè)上都具有寡糖?？鼓傅拇我问溅?抗凝血酶始終未占據(jù)單個(gè)糖基化位點(diǎn)。

【產(chǎn)品用途】：本試劑盒僅供科研使用，定量檢測(cè)細(xì)胞液、體液、組織、血清、血漿等標(biāo)本中的AT-Ⅲ。凡訂購我司任意一款試劑盒均享受免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，歡迎咨詢、訂購！

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備要點(diǎn)：

1. 準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料（如：37℃恒溫箱，450nm酶標(biāo)儀、高速離心機(jī)、高精度加樣器及槍頭等等）

2. 按照生物實(shí)驗(yàn)室安全防護(hù)條例，穿著實(shí)驗(yàn)服并佩戴乳膠手套做好防護(hù)工作

3. 使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)各試劑取出，平衡至室溫（至少30分鐘）

4. 嚴(yán)格按照說明書的操作方法進(jìn)行操作。說明書以英文說明書為準(zhǔn)。

犬抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）ELISA檢測(cè)試劑盒組成：（檢測(cè)范圍請(qǐng)以新版說明書為準(zhǔn)）

注意：使用前請(qǐng)檢查試劑盒中試劑的標(biāo)簽和數(shù)量與表格是否一致。 

操作步驟：

【平衡試劑盒至常溫】：取出實(shí)驗(yàn)過程中所需板條，剩余半條用自封袋密封放回4攝氏度。

【加樣】：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL。在樣本孔先加樣本10μl再加稀釋液40μl，（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）
【加酶】：標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔總每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL空白孔除外。
【溫育】：用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃恒溫箱溫育60分鐘。
【配液】：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
【洗滌】：小心揭掉封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后甩去洗滌液，吸水紙上拍干。如此重復(fù)5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

【顯色】：每孔先加入底物溶液A 50μl，再加入底物溶液B 50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光孵育15分鐘。
【終止】：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
【測(cè)定】：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

【說明】：電子版說明書僅供參考，實(shí)際操作請(qǐng)按照隨產(chǎn)品發(fā)送的印刷版說明書。中英文說明書可能會(huì)有不一致的地方請(qǐng)以英文說明書為準(zhǔn)。

安全性：

1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。

2． 實(shí)驗(yàn)中不要進(jìn)食、抽煙或使用化妝品。

3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

保存條件及有效期：

1.試劑盒保存：2-8℃

2.有效期：6個(gè)月